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跑pcr变异系数大致在什么水平结果比较可靠

来源:新能源网
时间:2024-08-17 15:29:15
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跑pcr变异系数大致在什么水平结果比较可靠热心网友:实时定量PCR (real-time quantitative PCR),简称real-time PCR,q-pcr,q-RT

热心网友:实时定量PCR (real-time quantitative PCR),简称real-time PCR,q-pcr,q-RT-PCR等等,都是一个意思。普通PCR结果反映的其实是PCR的结果,而当PCR经过多伦循环到平台期后,很难反映原来模板的浓度;而实时定量PCR 反映的是PCR的过程,它起飞时间的Ct值可以精确反映模板的浓度。定义,操作,原理什么的我就不说了,自己查百度百科和文库,我就从实战给你点注意事项吧。1 选好内参基因,特别是同一物种不同组织中某基因的表达情况,一定要别人报道过在你检测的组织中变化不大,如果你只是拿一个别的物种中的同源基因,别人肯定会argue你的,如果有可能可以双内参。2 最好有标准曲线,标曲反应扩增效率,这样比较准确点,不然只能用2 delta delta t法了,有些杂志扣的话,不太好解释。标曲可以用cDNA来制备,还可以直接有已知模板来制(可以搜一下网上的标曲制备方法)3 结果先看融解曲线,如果只有特异的单一融解峰,再去分析数据,不然没有意义。

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热心网友:额