谁能讲讲植物组织培养的具体步骤
谁能讲讲植物组织培养的具体步骤热心网友: 哪个部分都可以,根块茎部大概比较方便 选用液态培养基 要经常更换培养基 注意消毒,杀菌###热心网友:植物組織培養步驟一、培養材料的采集
热心网友: 哪个部分都可以,根块茎部大概比较方便 选用液态培养基 要经常更换培养基 注意消毒,杀菌
###热心网友:植物組織培養步驟一、培養材料的采集 組織培養所用的材料非常廣泛,可采取根、睫、葉、花、芽和種子的子葉,有時也利用花粉粒和花藥,其中根尖不易滅菌,一般很少采用。 對于木本花卉來說,闊葉樹可在一、二年生的枝條上采集,針葉樹種多采種子內的子葉或胚軸,草本植物多采集睫尖。 在快速繁殖中,最常用的培養材料是睫尖,通常切塊在0.5厘米左右,如果為培養無病毒苗而采用的培養材料通常僅取睫尖的分生組織部分,其長度在0.1毫米以下。这里使用马铃薯 二、培養材料的消毒 (一)先將材料用流水沖洗干淨,最後一遍用蒸餾水沖洗,再用無菌紗布或吸水紙將材料上的水分吸干,並用消毒刀片切成小塊。 (二)在無菌壞境中將材料放入70%灑精中浸泡30-60秒。 (三)再將材料移入漂白粉的飽和液或0.01%升汞水中消毒10分鐘。 (四)取出後用無菌水沖洗三、四次。 三、制備外植體 將已消毒的材料,用無菌刀、剪、鑷等,在無菌的環境下,剝去芽的鱗片、嫩枝的外皮和種皮胚乳等,葉片則不需剝皮。然後切成0.2-0.5厘米厚的小片,這就是外植體。在操作中嚴禁用手觸動材料。 四、接種和培養 (一)接種 在無菌壞境下,將切好的外植體立即接在培養基上,每瓶接種4-10個。 (二)封口 接種後,瓶、管用無菌藥棉或賓吨f,培養皿用無菌膠帶封口。 (三)溫度 培養基大多應保持在25℃左右,但要因花卉種類及材料部位的不同而區別對待。 (四)增殖 外植體的增殖是組培的關鍵階段,在新梢等形成後為了擴大繁殖系數,需要繼代培養。把材料分株或切段轉入增殖培養基中,增殖培養基一般在分化培養基上加以改良,以利于增殖率的提高。增殖1個月左右後,可視情況進行再增殖。 (五)根的誘導 繼代培養形成的不定芽和側芽等一般沒有根,必須轉到生根培養基上進行生根培養。1個月後即可獲得鍵壯根系。 五、組培苗的練苗移栽 試管苗從無菌到光、溫、濕穩定的環境進入自然環境,必須進行煉苗。一般移植前,先將培養容器打開,于室內自然光照下放3天,然後取出小苗,用自來水把根系上的營養基沖洗干淨,再栽入已準備好的基質中,基質使用前最好消毒。移栽前要適當遮蔭,加強水分管理,保持較高的空氣濕度(相對濕度98%左右),但基質不宜過濕,以防爛苗。
###热心网友:把它切成块,用土埋。明年就长出来了
###热心网友:植物组织培养材料和方法 植物组织培养材料和方法 从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。 由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(1~10%)、次氯酸钠溶液(0.5~10%)、升汞溶液(0.01%)、乙醇(70%)或过氧化氢(3~10%)等处理后,再用无菌水反复冲洗至净,然后在无菌室内,将所取的组织迅速培养在固体培养基上。在适宜的条件下,受伤组织切口表面不久即能长出一种脱分化的组织堆块,称为愈伤组织(Callus),此种愈伤组织在适当的培养基上经一定时间即能诱导生长成整株植物,因此愈伤组织既可是某种植物代谢产物的来源,又是诱导成株的主要途径之一。 在适宜的培养条件下,还可使愈伤组织长期传代生存下去,这种培养称为继代培养。但在继代培养中,不少植物培养的组织或细胞随着再培养代数的增加,分化能力就逐渐降低甚至丧失,其原因可能是由于在培养过程中原有母体中存在的、与器官形成有关的特殊物质被逐渐消耗所致,因此可以用激素或改善营养条件使之恢复,也有认为是组织和细胞在长期培养中遗传往的改变,主要是染色体的变化,出现大量多倍性或非整倍性细胞,这种改变恢复的可能住较小。不同的培养基可以使愈伤组织具有不同的生长速度,结构也可松可紧,利用这些特性可使之分散成为单细胞或很小的细胞团。要形成单细胞培养宜在较高盐分、高生长素及高水解酪蛋白的培养基中进行,然后移入液体并经搅拌而分散成单细胞。也有用加入一些果胶酶的办法,但一般来说要得到纯一的单细胞是很少的。 在培养药用植物选材时,还应考虑到所需要的次生物质在植物体中的合成部位,如果选材和培养方法适当,可使原植物内所产主的代谢物通过细胞或组织培养发生生化转变而获得。 通过组织培养可获得有效成分,但实际上只有大量培养成功才有经济价值。因此在生产上常采用悬浮培养法来代替含有琼脂的固体培养基。愈伤组织悬浮培养的生长通常比静止培养快,这是由于悬浮培养时营养成分可较快地渗入细胞,抑制生长的代谢废物可较快地除去,同时供氧情况也较好,在进行这种培养时要注意通气与定期更新营养液,这是保证生长稳定,次生物质产量高的关键之一。
###热心网友:马铃薯培养基 马铃薯 20g 蔗糖 2g 自来水 100mL 琼脂 2g pH 自然(约6.0) 灭菌 1.05kg/cm2,20min 马铃薯处理方法: 马铃薯去皮,切成块加水,煮沸30min(注意火力的控制,可适当补水) ,用纱布过滤,滤液加糖,补足水至100ml,装入三角瓶。
###热心网友:植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织。不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做愈伤组织。再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化,产生出植物的各种器官和组织,进而发育成一棵完整的植株。 植物组织培养即植物无菌培养技术,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株的学科 补充: Plant tissue culture(植物组织培养): 〈广义〉又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 〈狭义〉组培指用植物各部分组织,如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。 植物组织培养步骤 第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放人为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物,除去脂质性的物质,便于灭菌液的直接接触。当然,最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。 第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之70%酒精穿透力强,也很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下,待酒精蒸发后再剥除外层,取用内部材料。 第三步是用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多,可根据情况选取1—2种使用见表。第四步是用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3-l0次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意:①酒精渗透性强,幼嫩材料易在酒精中失绿,所以浸泡时间要短,防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料,特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些,如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱,一般浸泡10分钟左右,对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿,所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08—0.12%的吐温20或80(一种湿润剂),可以降低植物材料表面的张力,达到更好的消毒效果。
###热心网友:植物组织培养的应用 快速繁殖优良植物株系 组织培养具有时间短、增殖率高和全年生产等优点,比大田生产快得多。加上培养材料和试管苗的小型化,这就可使有限的空间培养出大量个体。例如兰花(Cymbidium)、桉树(Eucalyptus)、杨树、秋海棠等植物,用一个茎尖或一小块叶片为基数,经过组织培养,一年内可以增殖到10000~100000株,繁殖速度如此快,说明组织培养对于短期内需要大量繁殖的植物,如引入的优良品种、优良单株、育种过程中优良子代的扩大等,特别有用,而且对一些难以繁殖或繁殖很慢的名贵花卉、果木及稀有植物,同样具有重要意义。 培育作物新品种 用组织培养方法培育作物新品种,已经取得了多方面的成就。例如利用组织培养解决杂交育种中的种胚败育问题,获得了杂种子代,使远缘杂交得以成功;用花药培养和对未传粉的子房进行离体培养,获得了单倍体植株,从而开辟了单倍体育种的途径;通过胚乳离体培养,获得了三倍体植株,为改良农、林、果树和蔬菜的三倍体育种提供了新的方法;此外还有利用原生质体培养及体细胞杂交进行天然突变系的筛选、外源遗传物质的导入等等。 获得无病植株 作物的病毒病害,是当前农业生产上的严重问题。尤其是营养繁殖的作物,病毒可以经繁殖用的营养器官传至下一代,以致随着作物繁殖代数的积累,病毒不仅绵延不绝,还会日益增多。其结果能使作物退化减产,甚至导致某些品种绝灭。 根据病毒在植物体内分布并不均匀的特点,用生长点进行组织培养,结合病毒鉴定,可以得到无病毒植株。这就可以使植株复壮,并能增加产量。在这方面,马铃薯(Solanum tuberosumL.)、水仙(Narcissus tazatia L. var. chinensis Roem)、苹果、梨(Pyrus)和花椰菜(Brassica oleracea var.bo-trytis L.)等作物,都取得了明显效果。 保存和运输种质 由于有了组织培养方法,就无需再用一代代保存种子的方法去保存种质资源,而可以将植物器官、组织甚至细胞,在低温或超低温条件下进行长期保存。将来一旦需要,就可用组织培养方法迅速进行繁殖。这样不但大大减少了一代代保存材料所浪费的人力、物力和时间,而且也减少了在保存过程中因管理不善及病虫侵害所造成的损失。另外,由于用很小的空间保存了大量的种质资源,运输时也很方便。
###热心网友:先把种子放在适宜的土壤中,常常浇水。
###热心网友:把马铃薯打碎,取得里面的淀粉,经过多层纱布过滤,即可作为培养基使用。
###热心网友:中国农业出版社出版的《花卉组织培养》里面写的非常详细,连无土栽培的配方都有,自己去看看吧!
###热心网友:不用吧,种植土豆还用培养基,小时候光种那东西了。取一个土豆,当然,要选好的优良种子,然后就可以分割它做种,这个步骤很关键,可以分成很多块,也可以分成二块,但前提必须是每块上面都有芽,就是土豆上面的小坑儿。它就是土豆的胚胎,呵。这个小原理都知道,没有胚胎,植物是不会生长的。割好种子后,埋进土里就OK了。还有一些小细节,种子不要埋得太浅,因为怕风吹走上面的土壤,露出种子,它就会变成青色的,无法食用。当然有条件一定要施些肥料。会生长得很好,没有也无所谓了。两株之是的距离不能太近。待生长出秧子后,要以常备垄。呵,这都是农家的话了。如果雨水多,土豆就不会面,反之,就会很面,口感极佳。它一般不生虫子。但它可是那些散放动物的最爱。别的没啥了,就这样简单!回答得不好,见谅了!
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