基于秸秆厌氧干发酵的FISH预处理条件优化

【摘要】：优化了荧光原位杂交技术(FISH)定量测定秸秆厌氧干发酵基质中微生物的样品预处理条件,并在最优条件下做了验证性实验。结果表明:使用无水乙醇作为清洗液,FISH样品的荧光信号强度和丰度比用PBS清洗液(磷酸缓冲盐溶液)时有显著提高;样品预处理过程中加无菌玻璃珠震荡能提高微生物的分散度,从而提高FISH技术对秸秆厌氧发酵基质中微生物定量的准确性;采用离心转速为13 000 r/min时,微生物菌体收集率提高,而且还能保证完好的细胞形态,为后续的FISH杂交奠定基础。 【作者单位】： 山东理工大学农业工程与食品科学学院;
【关键词】： 秸秆 干发酵 微生物 FISH技术 预处理
【基金】：国家自然科学基金(51008185) 山东省中青年科学家科研奖励基金(BS2011NJ015) 山东理工大学青年支持计划(110011)
【分类号】：X172
【正文快照】： 为了研究和监控厌氧发酵体系的生态系统和发酵进程,必须寻找一种准确、快速的微生物定量方法。荧光原位杂交技术在对环境微生物的检测研究方面有着较好的优势,如安全、快速、灵敏等特点[1-5]。因此该技术在近几年逐渐成为研究环境微生物的重要检测方法。对于荧光原位杂交技术(

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