【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：X172
【目录】：
- 中文摘要6-8
- Abstract8-13
- 第一章 引言13-17
- 一、研究意义13-14
- 二、研究目的与内容14-15
- 三、研究结构流程图15-17
- 第二章 文献回顾17-57
- 引言17
- 一、抗生素进入生态环境的途径17-18
- 二、环境中的抗生素,细菌和耐药性18-20
- (一)、环境中的抗生素18
- (二)、环境中的细菌18-19
- (三)、环境中的抗生素耐药性19-20
- 三、水环境中耐药菌的污染现状20
- 四、水环境中耐药基因传递机制初探20-21
- 五、水环境中耐药菌的主要来源21-22
- (一)、医院和制药厂污水排放21-22
- (二)、城市下水道和污水处理厂22
- 六、水环境中耐药菌的危害研究22-23
- 七、环境中的四环素23-52
- (一)、四环素的发现与发展24-27
- (二)、四环素的耐药性27-52
- 八、水环境中四环素存在情况的国内外研究进程52-54
- 九、总结54-55
- 十、未来方向55-57
- 第三章 污水处理厂活性污泥中耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)的研究57-68
- 简介57
- 一、乳糖发酵型肠杆菌(LFE)简介57-58
- 二、采样点简介58-60
- (一)、上海市闵行区污水处理厂58-60
- (二)、滴水湖60
- (三)、采样点60
- 三、材料60-61
- (一)、药品与试剂60
- (二)、相关仪器60
- (三)、培养基60-61
- 四、方法61
- (一)、细菌培养61
- (二)、培养基配置61
- 五、结果与分析61-68
- (一)、菌落基本形态61-62
- (二)、细菌总数62-63
- (三)、不同工况处理后对TR-LFE和LFE细菌数的影响63-64
- (四)、各季节不同工况处理后对TR-LFE和LFE细菌数的影响64-66
- (五)、本章小结66-68
- 第四章 污水处理厂活性污泥中耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型分析68-88
- 简介68
- 一、材料68-69
- (一)、菌株68
- (二)、药品与试剂68-69
- (三)、相关仪器69
- 二、方法69-72
- (一)、DNA模板制作69
- (二)、PCR反应69-71
- (三)、琼脂糖凝胶电泳71
- (四)、限制性片段长度多态性分析(RFLP)71
- (五)、PCR产物纯化71-72
- (六)、测序鉴定72
- 三、结果与分析72-88
- (一)、耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型统计72-81
- (二)、多重耐药性耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)基因型统计81-82
- (三)、限制性片段长度多态性分类分析82-83
- (四)、测序结果83-86
- (五)、本章小结86-88
- 第五章 耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)质粒DNA对耐药基因的验证88-95
- 简介88
- 一、材料88
- (一)、菌株88
- (二)、药品与试剂88
- (三)、相关仪器88
- (四)、培养基88
- 二、方法88-91
- (一)、细菌培养88
- (二)、抽提质粒88-90
- (三)、琼脂糖凝胶电泳90
- (四)、质粒DNA大小的测定90
- (五)、PCR检测质粒携带的耐药性基因90
- (六)、PCR产物纯化90
- (七)、测序鉴定90-91
- 三、结果与分析91-95
- (一)、质粒抽提结果91
- (二)、PCR验证质粒携带的耐药性基因91-92
- (三)、测序结果92-94
- (四)、本章小结94-95
- 第六章 污水处理厂活性污泥中四环素耐药基因的研究95-102
- 简介95
- 一、材料95-96
- (一)、药品与试剂95-96
- (二)、相关仪器96
- 二、方法96-97
- (一)、活性污泥的DNA提取96-97
- (二)、PCR反应97
- 三、结果与分析97-102
- (一)、不同季节活性污泥中耐药基因的出现情况97-99
- (二)、污水处理过程中耐药基因的出现情况99-100
- (三)、滴水湖耐药基因的相关情况100
- (四)、本章小结100-102
- 第七章 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对四环素耐药基因的量化102-111
- 简介102
- 一、材料102
- (一)、药品与试剂102
- (二)、相关仪器102
- 二.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定方法102-104
- (一)、标准品浓度102-103
- (二)、标准曲线103-104
- (三)、扩增曲线104
- 三.结果与分析104-111
- (一)、闵行污水厂tet(A)和tet(C)基因的量化104-107
- (二)、污水处理过程中tet(A)和tet(C)基因的变化107
- (三)、紫外(UV)消毒前、后的出水样品107-108
- (四)、滴水湖tet(A)和tet(C)基因的量化108-110
- (五)、本章小结110-111
- 第八章 总结和展望111-116
- 一、总结111-114
- 二、展望与建议114-116
- (一)、展望114
- (二)、建议114-116
- 附录116-122
- 附录1 tet基因PCR扩增结果图116-118
- 附录2 闵行污水厂活性污泥PCR扩增结果118-120
- 附录3 闵行污水厂81株TR-LFE菌株质粒提取图谱120-122
- 参考文献122-134
- 致谢134
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