椰子油对不同日粮条件下绵羊瘤胃微生物及甲烷产量的影响
椰子油对不同日粮条件下绵羊瘤胃微生物及甲烷产量的影响【摘要】:本文以8只装有永久性瘤胃瘘管的绵羊为实验动物,采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)技术,研究日粮中添加椰
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S826
【目录】:
- 摘要2-4
- Abstract4-9
- 第一章 文献综述9-29
- 1 引言9-11
- 2 瘤胃微生物的主要种类及功能11-14
- 2.1 细菌的特点及其在瘤胃发酵中的作用11-12
- 2.1.1 产甲烷菌的特点及其在瘤胃发酵中的作用11-12
- 2.1.2 琥珀酸丝状杆菌的特点及其在瘤胃发酵中的作用12
- 2.1.3 黄色瘤胃球菌的特点及其在瘤胃发酵中的作用12
- 2.2 真菌的特点及其在瘤胃发酵中的作用12-13
- 2.3 瘤胃原虫的特点及其在瘤胃发酵中的作用13
- 2.4 瘤胃微生物间的相互关系13-14
- 3 瘤胃微生物的影响因素14-17
- 3.1 年龄因素14-15
- 3.2 动物品种15
- 3.3 饲料供给技术15-16
- 3.4 采食水平16-17
- 3.5 季节与地域影响17
- 4 甲烷产量的影响因素及检测方法17-23
- 4.1 甲烷的产生机理17-18
- 4.2 影响甲烷产量的因素18-19
- 4.2.1 采食水平18
- 4.2.2 碳水化合物类型18
- 4.2.3 饲料加工处理和贮存18-19
- 4.2.4 脂肪的添加19
- 4.2.5 离子载体19
- 4.2.6 原虫19
- 4.3 抑制甲烷产生的模式19-21
- 4.3.1 抑制产H_2 和产CO_2 的细菌20
- 4.3.2 直接对甲烷菌产生毒性20
- 4.3.3 阻止甲烷合成的一些特殊反应20
- 4.3.4 提供电子释放的新途径20-21
- 4.3.5 分解已经产生的甲烷21
- 4.4 甲烷产量的检测21-23
- 4.4.1 甲烷产量的估计21-22
- 4.4.2 监测反刍动物甲烷排放量的方法22-23
- 5 瘤胃微生物的定量研究方法23-27
- 5.1 传统定量方法23-25
- 5.1.1 稀释平板计数法24
- 5.1.2 最大或然数法24-25
- 5.2 分子生物学定量方法25-27
- 5.2.1 点杂交和狭线杂交25
- 5.2.2 变性(或温度)梯度凝胶电泳25-26
- 5.2.3 定量PCR 技术26-27
- 6 研究目的、意义及主要内容27-29
- 第二章 瘤胃瘘管的设计与安装29-34
- 1 材料与方法29-32
- 1.1 材料29
- 1.1.1 实验动物29
- 1.1.2 实验仪器及药品29
- 1.2 方法29-32
- 1.2.1 新型瘘管的设计(如图1 所示)29-30
- 1.2.2 术前准备30-31
- 1.2.3 手术31
- 1.2.4 术后护理31-32
- 1.2.5 术后观察32
- 2 结果与分析32-33
- 2.1 麻醉效果32
- 2.2 术后表现32-33
- 3 结论33-34
- 第三章 椰子油对不同日粮条件下绵羊瘤胃微生物的调控34-53
- 1 材料与方法34-38
- 1.1 试验动物及饲养管理34
- 1.2 试验设计与试验方案34
- 1.3 瘤胃液的采集34-35
- 1.4 瘤胃微生物总DNA 的提取35-36
- 1.4.1 生化试剂35
- 1.4.2 主要仪器35-36
- 1.4.3 主要分子生物试剂配制36
- 1.4.4 瘤胃微生物DNA 的提取步骤36
- 1.5 保存36-37
- 1.6 瘤胃总 DNA 浓度的测定37
- 1.7 Real Time-PCR 的定量37-38
- 1.7.1 目标菌种的监测37-38
- 1.7.2 标准曲线的制作38
- 2 结果与分析38-49
- 2.1 添加椰子油对瘤胃微生物总浓度影响39
- 2.2 Real-time PCR 标准曲线39-43
- 2.2.1 瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)的Real-time PCR 标准曲线39-40
- 2.2.2 瘤胃真菌(Fungi) 的Real-time PCR 标准曲线40-41
- 2.2.3 黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的Real-time PCR 标准曲线41-42
- 2.2.4 琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)的 Real-time PCR 标准曲线42-43
- 2.3 瘤胃微生物的定量分析43-47
- 2.3.1 瘤胃甲烷菌(Ruminococcus methanogen)的Real-time PCR 定量分析43-44
- 2.3.2 瘤胃真菌(Fungi) 的Real-time PCR 定量分析44-45
- 2.3.3 黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)的Real-time PCR 定量分析45-46
- 2.3.4 琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)的 Real-time PCR 定量分析46-47
- 2.4 结果与分析47-49
- 3 讨论49-53
- 第四章 饲粮中添加椰子油对绵羊瘤胃甲烷产量及发酵特性的影响53-61
- 1 材料与方法53-59
- 1.1 试验动物及饲养管理同第三章53
- 1.2 试验设计与试验方案53
- 1.3 瘤胃液的采集53
- 1.4 测定项目及方法53-59
- 1.4.1 瘤胃甲烷产量的监测与调控53-56
- 1.4.2 氨态氮(Ammonia-N)56-57
- 1.4.3 挥发性脂肪酸(VFA)57-58
- 1.4.4 pH58-59
- 2 结果59
- 3 讨论59-61
- 结论、创新点与后续研究展望61-62
- 1 结论61
- 2 创新点61
- 3 后续研究展望61-62
- 致谢62-63
- 参考文献63-69
- 个人简介69-70
- 导师简介70-71
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