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甲烷氧化细菌(Methylosinus methanica)81Z中与甲醇氧化有关基因的克隆

来源:论文学术网
时间:2024-08-18 20:32:36
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甲烷氧化细菌(Methylosinus methanica)81Z中与甲醇氧化有关基因的克隆【摘要】:以大肠杆菌(E.coli)DH-1菌株和考斯质粒pLA 2917为宿主-载体系

【摘要】:以大肠杆菌(E.coli)DH-1菌株和考斯质粒pLA 2917为宿主-载体系统,建立了甲烷氧化细菌(Methylosinus methanica)81Z染色体基因文库。甲醇利用菌(Methylobacterium organophilum)XX的甲醇脱氢酶(MDH)结构基因片段(2.5kb)经α-~(32)P标记后作为探针对该文库进行筛选,得到两个杂交阳性重组质粒,即pG5和pH11,其中pG5的插入片段为25.4kb,互补分析表明:pG5的插入片段能使包括MDH和细胞色素C(Cyt.c)基因突变株在内的5株甲醇利用菌(Methylobacterium sp.)AM1的甲醇氧化阻滞突变株恢复在甲醇上的生长能力,并且能使3株甲醇利用菌XX的甲醇氧化阻滞突变株恢复野生型生长。至少有4个与甲醇氧化有关的基因位于该片段上。Southern blot杂交进一步证实:该插入片段与探针同源的区域在其4.8kb Sal Ⅰ片段内。 【作者单位】: 中国科学院成都生物研究所;Gray
【关键词】甲烷氧化细菌 甲醇氧化 基因克隆
【正文快照】: 甲烷氧化细菌812是从沼气发生器中分离到的一株11型专性甲烷氧化细菌田。该菌纯培养物具有这类菌的基本特征:以甲烷为生长的唯一碳源和能源,严格好氧。它能够在沼气发生器这种厌氧环境中生存,可能具有一套特殊的代谢调节系统。对它的C:代谢有关基因及其调节机理的研究,有助于

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