煤层水中一株产甲烷菌的分离与系统发育分析

【摘要】：为了解煤层中产甲烷菌的生理生化特性,结合厌氧培养箱和平板划线分离技术从山东兖煤菏泽能化公司赵楼煤矿距离地表936 m处坑道顶板取得40℃煤层水样品中微生物进行富集分离纯化.结果表明:在该条件下存在产甲烷微生物,并分离得到一株产甲烷菌株M-3,该菌株呈短杆状,菌体大小约(1.0-2.0)μm×0.5μm;革兰氏染色显阳性;在平板上生长出圆形黄色菌落,边缘光滑整齐;可以利用乙酸、甲酸、甲醇和H2+CO2(V/V=2:1)作为唯一碳源生长;最适生长温度为45℃;对酸碱具有良好的适应性,中性条件下甲烷产量最多;最适NaCl浓度为0.2-0.6 mol L-1.对菌株M-3的16S rRNA基因序列同源性分析表明该菌株与Methanobacterium bryantii同源性高达99%,G+C含量32.9%.本研究通过形态、生理生化特性以及16S rRNA分析,鉴定菌株M-3为M.brytantii. 【作者单位】： 中国矿业大学化工学院;中国矿业大学煤炭加工与高效洁净利用教育部重点实验室;
【关键词】： 产甲烷菌 煤层水 菌株分离鉴定 S rRNA 系统发育分析
【基金】：国家自然科学基金项目(51204184) 江苏省自然科学基金项目(BK2012137)资助~~
【分类号】：X703
【正文快照】： 煤层气(Coal bed methane,CBM)是自生自储于煤层中的气体,其主要成分是甲烷,是一种非常优质的清洁能源,也是当前国家大力提倡开发的新能源[1-2].根据煤层气的同位素组成和煤中镜质组R0值分析,煤层气分为生物成因气和热解气两大类[3-4].生物成因煤层气是产甲烷菌等厌氧菌代谢煤

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